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SOCIO SANITARIO

7 dì nel laboratorio di gene"ca delle mala!e neurodegenera"ve e metaboliche
Estrarre DNA

di SOFIA YING LI (3°G)

urante la setti- lare la qualità e la quan-
mana di alter- tità del campione di
nanza scuola DNA estratto.
Dlavoro presso la • Conclusione del-
Fondazione IRCCS l’estrazione DNA con fe-
Carlo Besta ho eseguito nolo e dosaggio DNA
le seguenti attività: ottenuto.
• Estrazione DNA con • Preparazione del tam-
fenolo. Si effettua questa pone di corsa per gel di
procedura per avere un agarosio.
DNA di buona qualità. • Preparazione di gel di
Si parte da un campione agarosio per l’analisi
di sangue estratto in am- qualitativa del DNA.
bulatorio, che verrà lavo- Questa preparazione av-
rato con diversi passaggi viene sotto cappa
per ottenere solamente i • Caricamento del gel e
globuli bianchi, perchè corsa del DNA .
uniche particelle del san- • Spiegazione PCR: la
gue con un nucleo e PCR è una reazione en-
quindi con DNA. Una zimatica che serve per
volta ottenuti i globuli amplificare a catena una
bianchi, si aggiunge un parte di DNA. Questa
sapone che scioglierà le reazione mima la dena-
membrane delle cellule e turazione che avviene in
un enzima, la protenasi natura.
K, che mangerà le mem- • Preparazione del ter- • Costruzione di primer per analisi del prodotto
brane in modo da avere reno per lo scongela- per PCR. della PCR.
un DNA libero. A questo mento dei linfoblasti in • Visione al microsco- • Cenni di analisi NGS
punto si aggiunge il fe- camera sterile. pio e divisione di claster e spiegazione della co-
nolo-cloroformio per di- • Coltura e immortaliz- di linfoblasti. struzione e dell’utilità
struggere la struttura zazione da linfociti a lin- • Spiegazione del co- dei pannelli genici.
secondaria del DNA e foblasti. dice genetico. Tutte le attività descritte
ottenere solo la struttura • Osservazione al mi- • Spiegazione delle mu- venivano svolte sotto
primaria (DNA a doppia croscopio di linfoblasti e tazioni puntiformi, dei controllo dei tecnici di
elica) che verrà analiz- fibroblasti. quattro tipi di mutazioni laboratorio; in partico-
zato con la PCR. • Spiegazione appro- puntiformi e delle dele- lare erano controllati gli
• Uso di estrattore auto- fondita della PCR, del- zioni genetiche. standard di esecuzione e
matico di acidi nucleici. l’analisi di sequenza • Prelevazione DNA la tempistica.
Permette di avere il nucleotidica, dei pannelli dalla camera fredda e Nonostante ciò mi era
DNA in meno tempo ma genici e dei geni. dosaggi. concessa una sufficiente
con una qualità più • Spiegazione dei tipi di • Archiviazione DNA autonomia operativa, per
bassa. Il prodotto otte- trasmissione delle malat- nella camera fredda. quanto possibile, sotto
nuto poi viene dosato tie genetiche (domi- • Caricamento di PCR. osservazione di Elena
con uno spettro fotome- nante, recessiva e X • Costruzione e carica- Rizzo, tecnico di labora-
tro che serve per control- linked). mento gel di agarosio torio in organigramma, e

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